影響抗原抗體反應(yīng)的兩方面因素
抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機體內(nèi)進行,也可以在機體外進行??乖贵w反應(yīng)的過程是經(jīng)過一系列的化學和物理變化,包括抗原抗體特異性結(jié)合和非特異性促凝聚兩個階段,以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化。 影響抗原抗體反應(yīng)的因素有兩方面,一是反應(yīng)物自身的因素;二是反應(yīng)環(huán)境條件。
一、反應(yīng)物自身的因素
1.抗體:不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑。等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng)?!?/p>
2.抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象?!?/p>
二、反應(yīng)環(huán)境條件
1.電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
2.酸堿度:抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點。抗原抗體反應(yīng)一般在pH6~9進行,有補體參與的反應(yīng)pH為7.2~7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng)?! ?/p>
3.溫度:在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應(yīng)加速。一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞。每種試驗都有其獨特的最適反應(yīng)溫度要求。此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng)。