ELISA試劑盒質(zhì)量評估要素

       ELISA 法是免疫診斷中的一項新技術，現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結果，認為 ELISA 法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用臨床標本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本, 因此，也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。

ELISA 試劑盒基本原理：

1、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；
3、酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
由于 ELISA 法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應，產(chǎn)生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA 法是一種既敏感又特異的方法。

ELISA 試劑盒的質(zhì)量評估要素：

1、特異性
特異性簡單來說就是陰性樣本的陰性檢出率，要保證這一點首先就需要做到與其他檢測抗體（原）無交叉感染，并且保證陰性樣本檢出的準確性。

2、靈敏度
靈敏度簡單來說就是陽性樣本的陽性檢出率，一方面能夠反映出試劑盒對于被檢物質(zhì)的最低檢測能力，另一方面需要保證陽性樣本檢出的準確性?？赏ㄟ^我們自身待檢物質(zhì)的性質(zhì)進行選擇，如果我們待檢物質(zhì)濃度量很低，可以選擇高靈敏的試劑。

3、精密性
又可稱作重復性，一般而言，對于 ELISA 試劑盒而言，板間及板內(nèi)精密性可控制在 15% 以內(nèi)。有些 ELISA 試劑盒精密性可達到 10% 以內(nèi)。

4、穩(wěn)定性
穩(wěn)定性是試劑盒必須有的基本屬性，是指試劑（盒）在有效期內(nèi)和規(guī)定條件下保持其性能的能力，一般有效期穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、以及凍融穩(wěn)定性。

5、操作簡便性
同樣對于 ELISA 的操作簡便程度大家也是非常關心的，操作時間以及操作步驟也是我們在選擇試劑盒過程中需要考慮的問題。