挑選適合實(shí)驗(yàn)ELISA試劑盒參照要素歸納
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA(enzyme-linked immunoadsordent assay)一種酶聯(lián)免疫技術(shù)。用于檢測(cè)包被于固相板孔中的待測(cè)抗原(或抗體)。即用酶標(biāo)記抗體,并將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使抗原抗體反應(yīng)在固相載體表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除,最后通過酶作用于底物后顯色來判斷結(jié)果。 目前市場(chǎng)上的 ELISA 試劑盒質(zhì)量參差不齊,試劑盒數(shù)以千計(jì),供應(yīng)商的科研實(shí)力也相差懸殊,試劑盒的質(zhì)量好壞會(huì)嚴(yán)重影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要。以下為歸納ELISA試劑盒選擇需考慮的要素參考。
1、基于研究物種選擇
如果樣品來自經(jīng)典模型,如人、小鼠和大鼠,則可以相對(duì)輕松地找到經(jīng)過驗(yàn)證的ELISA試劑盒。但如果樣品來自猴子等非經(jīng)典模型,則可獲得的商品ELISA試劑盒數(shù)量有限。
如果要檢測(cè)這些物種的指標(biāo),最好要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
2、基于分析目的選擇
ELISA是一種可用于定性和定量分析的工具。定性ELISA為樣品提供簡(jiǎn)單的陽性或陰性結(jié)果,而定量ELISA通過標(biāo)準(zhǔn)曲線反映樣品中分析物的濃度。您想要量化樣品中的分析物還是僅檢測(cè)樣品的存在與否?根據(jù)分析目的,您可以選擇定性ELISA或定量ELISA。
3、基于檢測(cè)樣本選擇
大多數(shù)商業(yè)ELISA試劑盒在血清/血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液中得到驗(yàn)證。請(qǐng)務(wù)必詳細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,以確保該產(chǎn)品與樣品兼容。此外,其他因素如溶血和樣品中脂質(zhì)的存在會(huì)干擾分析性能。因此,在選擇ELISA試劑盒之前,請(qǐng)考慮這些因素。建議對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),以驗(yàn)證試劑盒是否合適且對(duì)樣品是否敏感。
4、基于檢測(cè)范圍選擇
試劑盒的檢測(cè)范圍就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測(cè)樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對(duì)于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測(cè)定樣本。
在此之前,我們可以通過NCBI的文獻(xiàn),uniprot,pax-dab上給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較ELISA試劑盒中給出的樣本值與報(bào)道值是否一致。
5、基于樣本量選擇
商業(yè)化試劑盒的樣品用量通常需要10μL至100μL, 如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少,最好選擇需要較少量樣品的ELISA試劑盒。
6、基于文獻(xiàn)引用選擇
產(chǎn)品的文獻(xiàn)引用特別是高質(zhì)量的 SCI 文章的引用是很多客戶都關(guān)心的問題,這是業(yè)界對(duì)產(chǎn)品認(rèn)可的一個(gè)非常重要指標(biāo),而且對(duì)相關(guān)用戶的科研有一定的借鑒作用。
7、基于售前售后服務(wù)選擇
在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)條件下,服務(wù)理念已逐漸被企業(yè)家所重視,企業(yè)的營(yíng)銷環(huán)境發(fā)生了巨大的變化,高科技的廣泛應(yīng)用,信息高速流動(dòng),產(chǎn)品硬件標(biāo)準(zhǔn)趨同。對(duì)客戶所能提供的技術(shù)支持服務(wù)、問題處理的及時(shí)性、客戶的滿意度等也是選擇產(chǎn)品的考慮因素。
8、基于美譽(yù)度選擇
一個(gè)品牌不光要有名度,更重要的是美譽(yù)度。從同行或?qū)嶒?yàn)室同僚了解供應(yīng)商的口碑,也通過行業(yè)調(diào)查公司以及網(wǎng)絡(luò),相關(guān)宣傳資料等可以找到美譽(yù)度高的ELISA試劑盒供應(yīng)商,在一定程度上可以反映產(chǎn)品的質(zhì)量問題。
9、基于成本預(yù)算選擇
國(guó)際的品牌一般質(zhì)量可靠,文獻(xiàn)引用多。但國(guó)際品牌由于進(jìn)口和國(guó)際運(yùn)輸?shù)瘸杀据^高,因此售價(jià)也較高。其實(shí)優(yōu)質(zhì)國(guó)產(chǎn)品牌也是不錯(cuò)的選擇,因省去不少物流和報(bào)關(guān)費(fèi)用,與國(guó)外進(jìn)口試劑盒相比價(jià)格上有較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格, 如48T小包裝,非常適合中國(guó)國(guó)情。
10、基于關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)選擇
如需選取新的 ELISA 試劑盒,首先需要仔細(xì)評(píng)估檢測(cè)性能。重要參數(shù)包括靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍以及精度,這些在多數(shù)的 ELISA 試劑盒說明書中都有體現(xiàn)。對(duì)于典型樣品類型而言,其它參數(shù)對(duì) ELISA 性能更具預(yù)測(cè)價(jià)值。