一步法快速克隆試劑盒性能參數(shù)

一步法快速克隆試劑盒是一款簡單、快速、高效的DNA定向克隆產(chǎn)品，該試劑盒可以將PCR產(chǎn)物定向克隆至任意載體的任意位點(diǎn)，可高效克隆50 bp～10 kb片段。將載體在克隆位點(diǎn)進(jìn)行線性化，并在插入片段PCR引物5’端引入線性化克隆載體末端序列，使得插入片段PCR產(chǎn)物5’和3’最末端分別帶有和線性化克隆載體兩末端對應(yīng)的完全一致的序列 (15 bp～25 bp)。將這種兩端帶有載體末端序列的PCR產(chǎn)物和線性化克隆載體按一定比例混合，在重組酶的催化下，僅需反應(yīng)15 min即可進(jìn)行轉(zhuǎn)化，完成定向克隆?？寺￡栃月士蛇_(dá)95%以上?？寺≥d體酶切產(chǎn)物或PCR產(chǎn)物和插入片段PCR產(chǎn)物可以不進(jìn)行DNA純化直接用于重組克隆，極大的簡化了實(shí)驗(yàn)步驟。 一步法快速克隆試劑盒中2×Hieffclone Enzyme Premix預(yù)混了重組酶和重組反應(yīng)所需緩沖液，并添加了獨(dú)特的重組增強(qiáng)因子，可顯著提高重組克隆效率，即便使用低效率感受態(tài)細(xì)胞 (107cfu/μg)也可實(shí)現(xiàn)高效克隆 (100cfu/ng Vector)，重組體系還兼容常規(guī)酶切、PCR反應(yīng)體系。 該試劑盒可用于快速克隆、高通量克隆、無縫克隆和DNA定點(diǎn)突變。 運(yùn)輸與保存方法 冰袋（wet ice）運(yùn)輸 產(chǎn)品-20 oC保存 有效期1年。