細(xì)胞流式檢測(cè)說明
流式細(xì)胞術(shù)是一種在液體系統(tǒng)中,測(cè)定單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器的生物、物理和化學(xué)特性,并根據(jù)這些特性將所需要的細(xì)胞或細(xì)胞器進(jìn)行定量分析和分選的技術(shù)。它是一種可以檢測(cè)細(xì)胞或者生物學(xué)顆粒的多種特性的技術(shù),用來了解細(xì)胞群的均值和分布情況,并還可以分選感興趣的細(xì)胞、對(duì)該細(xì)胞做進(jìn)一步的培養(yǎng)研究。
分析型流式細(xì)胞儀(BD FACSCalibur)—只檢測(cè)不再培養(yǎng),細(xì)胞樣本分析后進(jìn)入廢液桶,不能回收利用。
分選型流式細(xì)胞儀(FACSAriaII)—檢測(cè)后培養(yǎng)既能流式分析,還能對(duì)分析的目的細(xì)胞進(jìn)行分選。
技術(shù)流程 :
1、 樣品制備:對(duì)于不同組織來源的實(shí)體組織和實(shí)體瘤標(biāo)本,應(yīng)該根據(jù)各自特點(diǎn)選擇不同的分散細(xì)胞方法,以期達(dá)到單細(xì)胞產(chǎn)量高、損傷小的目的。如酶消化法、機(jī)械法等;
2、 熒光標(biāo)記:熒光素偶聯(lián)抗體標(biāo)記、熒光染料/熒光化合物標(biāo)記、熒光蛋白;
3、 流式分析:根據(jù)客戶需要設(shè)置空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、同型對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn);
4、 結(jié)果分析:根據(jù)客戶需要提供散點(diǎn)圖、直方圖、等高線圖等。
研究對(duì)象:
動(dòng)植物細(xì)胞、微生物、細(xì)菌等生物體及其中的DNA、蛋白質(zhì)、塑料微球或微粒,還包括塑料微球或其他懸浮于液體中的微粒。
檢測(cè)范圍:
細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞大??;細(xì)胞顆粒度;細(xì)胞表面積;核漿比例;DNA含量與細(xì)胞周期;蛋白質(zhì)含量
細(xì)胞功能:細(xì)胞表面/胞漿/核的特異性抗原;細(xì)胞活性;細(xì)胞內(nèi)外的細(xì)胞因子;激素結(jié)合位點(diǎn);細(xì)胞受體;蛋白磷酸化;pH值;鈣離子濃度;細(xì)胞膜電位/線粒體膜電位