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解析ELISA顯色淡的原因
解析ELISA顯色淡的原因:
原因1:試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng),溫度太高。
解決方案:盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫。
原因2:培養(yǎng)箱溫度不足37℃。
解決方案:注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意。
原因3:保溫時(shí)間不足。
解決方案:校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)。
原因4:試劑盒未充分平衡。
解決方案:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。
原因5:洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加。
解決方案:按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)。
原因6:蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題。
解決方案:使用新鮮合格的蒸餾。
原因7:移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔。
解決方案:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用。
原因8:底物作用時(shí)間不足。
解決方案:準(zhǔn)確定時(shí)。
顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說(shuō)明操作即可。一般來(lái)說(shuō),顯色時(shí)間過(guò)短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加。
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