PCR實(shí)驗(yàn)室污染有哪些？

PCR檢測(cè)因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，不過正是由于它靈敏度極高，極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的假陽性，因此所有的預(yù)防措施都會(huì)稍稍有所不同（易查不易察），污染來的悄無聲息，我們?cè)撊绾螒?yīng)對(duì)。

那么，如何避免以及處理實(shí)驗(yàn)室污染，對(duì)PCR人來說是一門必修課。

1、PCR試劑污染

主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽性對(duì)照污染。

2、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染

這是 PCR 反應(yīng)中最主要最常見的污染問題。因?yàn)?PCR 產(chǎn)物拷貝量大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 PCR 檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限，所以極微量的 PCR 產(chǎn)物污染，就可形成假陽性。

還有一種容易被忽視的污染，是能造成PCR產(chǎn)物污染形式的氣溶膠污染，而氣溶膠造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問題。

3、樣本間交叉污染

主要是在采（?。拥倪^程中，由于取樣工具之間的交叉造成污染；或者在核酸提取的過程中，由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。

4、克隆質(zhì)粒污染

在實(shí)驗(yàn)操作中會(huì)經(jīng)常用到陽性參考品，這些參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成的，質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高，不小心使用極易造成污染。