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ELISA試劑盒試驗操作中溫度與加樣注意點

 ELISA試劑盒試驗操作中溫度與加樣注意點

一、溫度

1.試劑盒回溫

大多數(shù)試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后,先不要急于翻開試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且溶解后再用。提早1~2小時取出試劑盒,放在室溫中;或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。

2.環(huán)境溫度的操控

可采用以下辦法操控溫度:

1)試驗室應(yīng)配備溫濕度表,且確保定時計量。

2)依據(jù)天氣情況設(shè)定試驗室空調(diào)制冷或加溫功能,待室溫安穩(wěn)且無攪擾的條件下再開端檢測流程。

3)選用帶溫控設(shè)備的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標儀等。留意要提早敞開預(yù)熱。

3.孵育

孵育時要確保溫度均勻,防止蒸發(fā)變干。孵育時運用封板膜,并置于暗處孵育。多塊板一起試驗時,要平放各板,不要疊放,避免溫度擴散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。

二、加樣

1.加樣要快速準確,時刻宜操控在15分鐘內(nèi)。

2.如樣品量較大,可分次完成試驗,或?qū)y樣液置于預(yù)混微孔板中運用多通道移液器快速移取。

3.汲取同一試劑,可將試劑倒入V型加樣槽中,運用多通道移液器快速移取。

三、妥善保存

試劑盒至室溫后,取出要運用的酶標板孔,未運用的酶標板孔應(yīng)及時放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,2℃-8℃冷藏保存。切忌將未平衡至室溫的酶標板放回鋁箔袋,因為此刻因為溫度差,酶標板上會有水汽,不利于安穩(wěn)保存。大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時刻較短,環(huán)境溫度對檢測成果會有很大影響,所以操控好環(huán)境溫度是確保試劑盒檢測成果有用的重要因素。

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