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預(yù)防細(xì)胞被污染的幾個方面
預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的辦法。只有預(yù)防工作做在前,才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:
1.從操作者做起
①進無菌室前要用肥皂洗手,按規(guī)定穿隔離衣。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕,必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口,并將瓶口轉(zhuǎn)動燒灼。操作時盡量不要談話,若打噴嚏或咳嗽應(yīng)轉(zhuǎn)向背面。
③操作時要常更換吸管,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去。實驗完畢用消毒水浸泡的紗布擦臺面。
2. 從物品、用品消毒滅菌著手
細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細(xì),并在無菌試驗陰性后才能使用。
操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。
3.添加抗生素
4.無菌室的徹底消毒
① 0.1%新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室;
②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣休對各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。
5.防止細(xì)胞交叉污染
①在進行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時,所用器具要嚴(yán)格區(qū)分。
②在進行換液或傳代操作時,注射器和滴管不要觸及細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口,以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)液中污染其他細(xì)胞。
③細(xì)胞一旦購置或從別處引入,均應(yīng)及早留種凍存,一旦發(fā)生污染可重新復(fù)蘇培養(yǎng)。
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