胃蛋白酶（Pepsin）試劑盒微量法測(cè)定步驟

 測(cè)定原理：

胃蛋白酶可催化血紅蛋白水解，水解產(chǎn)物與福林試劑反應(yīng)后顯藍(lán)色；一定范圍內(nèi)，其顏色的深淺與胃蛋白酶活性呈正比。

測(cè)定步驟：

1.分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到580 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三和試劑四置于37℃水浴預(yù)熱30min。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測(cè)光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 空白管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL蒸餾水，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測(cè)光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)空白管。

5. 對(duì)照管：取 EP管，加入100 μL蒸餾水，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，蓋緊后搖勻1min；加入20μL粗酶液，混勻后8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測(cè)光吸收，記為A空白管。

6. 測(cè)定管：取 EP管，加入20μL粗酶液，100μL試劑三，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，蓋緊后搖勻1min；8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測(cè)光吸收，記為A測(cè)定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

測(cè)定意義：                           

胃蛋白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌，分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別，慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二指腸炎等癥狀時(shí)也會(huì)引起胃蛋白酶分泌的減少。