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pBI121
pBI121
商品描述:
商品屬性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
pBI121
英文名稱(chēng)
pBI121
規(guī)格
質(zhì)粒干粉
貨號(hào)
BJ-J1206
商品詳情
培養(yǎng)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質(zhì)粒干粉后,請(qǐng)加入 20μl 無(wú)菌水至管底,溶解質(zhì)粒,室溫靜置 1min; 2.混合(吸附質(zhì)粒): 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻,冰上放置 30min; 3.熱激導(dǎo)入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fù)培養(yǎng): 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yǎng): 將適當(dāng)體積(100 µl)的復(fù)蘇細(xì)胞,涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(瓊脂面務(wù)必干燥后), 倒置培養(yǎng) 12-16h,出現(xiàn)菌落。 7.提取: 挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng) 12-16h,根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。
生長(zhǎng)條件
LB +卡那霉素,37℃(克隆菌株Stbl3/DH5α,14758bp)
存儲(chǔ)條件
2-8℃
安全等級(jí)
1
應(yīng)用領(lǐng)域
pBI121載體是一個(gè)雙元植物農(nóng)桿菌表達(dá)載體,能夠高效轉(zhuǎn)染植物。該載體來(lái)源于pB221和Bin19載體。載體上含有從ColE1來(lái)源的ori復(fù)制元件,從CaMV中來(lái)源的pROK1元件,大腸桿菌新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶II基因(Neomycin phosphotransferase II Gene, NptII),新霉素抗性基因(Neomycin resistant gene, Neo), 敏感基因Beta葡糖苷酸酶(glucuronidase),Ter 農(nóng)桿菌Ti 質(zhì)粒胭脂氨酸合成酶原件等。pBI121載體是卡那抗性質(zhì)粒
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