商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	pTrc99a
英文名稱(chēng)	pTrc99a
規(guī)格	質(zhì)粒干粉
貨號(hào)	BJ-J1340

商品詳情

培養(yǎng)基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
傳代方法	1.溶解： 收到質(zhì)粒干粉后，請(qǐng)加入 20μl 無(wú)菌水至管底，溶解質(zhì)粒，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質(zhì)粒）： 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻，冰上放置 30min； 3.熱激導(dǎo)入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min； 5.修復(fù)培養(yǎng)： 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當(dāng)體積（100 µl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落。 7.提?。?挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h，根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒。
生長(zhǎng)條件	LB +氨芐青霉素，37℃（克隆菌株DH5α，6849bp ,啟動(dòng)子:Trc 復(fù)制子:PBR322 終止子:rrnB T2 ）
存儲(chǔ)條件	2-8℃
安全等級(jí)	1
應(yīng)用領(lǐng)域	科研
共享方式	公益性共享