單體親和素磁珠

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號
單體親和素磁珠	1ml（10mg/ml）	BJ-PJ6379

商品介紹：

產(chǎn)品介紹：
親和素（或鏈霉親和素）和生物素之間表現(xiàn)的相互作用，是已知的非共價相互作用最高的一種。親和素、鏈霉親和素、 單體親和素及其類似物已成為探針研究實(shí)驗(yàn)中強(qiáng)大的親和配體工具，被廣泛應(yīng)用于生化分析、診斷、親和純化和藥物遞送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一種高度均勻的超順磁性微球，表面包裹著高密度的超純（>97%）亞單位單體親和素。單體親和素源自天然四聚體蛋白，它保留了與天然親和素相同的生物素結(jié)合特異性，但其生物素結(jié)合親和力會有顯著降低（kD=~10-8 M）。因此，通過使用溫和的洗脫條件，例如含有2 mM 生物素的緩沖液，就可以很容易地從單體親和素中洗脫結(jié)合的生物素化分子。本款磁珠經(jīng)過專門設(shè)計(jì)、測試和質(zhì)量控制，可用于免疫沉淀、細(xì)胞分選，以及從細(xì)胞裂 解液或雜交反應(yīng)中快速一步捕獲生物素化分子，如DNA、RNA、抗體或蛋白質(zhì)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
·快捷，簡單的一步法高通量操作;無需純化柱或過濾器，或重復(fù)移液、離心等操作
（圖1）
·極高的結(jié)合能力，在溫和的條件下洗脫結(jié)合的生物素化分子
·在溫和的洗脫條件下純化生物素化樣品
·極小的非特異性結(jié)合
·對樣本體積要求低，便于自動化操作
·成本低：只有市場同類產(chǎn)品磁珠價格的一半
·磁珠至少可以重復(fù)使用5次
緩沖液

·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸鈉, 0.15 M 氯化鈉; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
磁力分離器（適用于手動操作）：根據(jù)實(shí)驗(yàn)時生物樣品的體積，使用者可以選擇以下不同型號的磁力分離器： 8 孔磁力架可以容納 8 個單獨(dú)的 1.5-2.0 ml 離心管 ; 24
孔磁力架可以容納 24 個單獨(dú)的 1.5-2.0 ml 離心管; 4 孔磁力-15 可以容納 4 個單獨(dú)的15ml 離心管; 4 孔磁力架-50 可以容納四個單獨(dú)的 50 ml 離心管。
操作過程
操作過程中實(shí)驗(yàn)體積可根據(jù)需要放大或者縮小
提示：在純化生物素化蛋白質(zhì)、多肽和其他分子之前。用戶應(yīng)將試劑盒中的所有試劑溫度 平衡至室溫，并用雙蒸餾水配制 1x 工作溶液。
1. 輕輕震動裝有磁珠的試劑瓶，直到磁珠完全懸浮。將 50µl 磁珠轉(zhuǎn)移到新試管中。
提示：客戶應(yīng)根據(jù)每個實(shí)驗(yàn)粗樣品中生物素化分子的數(shù)量，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定最佳的磁珠
使用量。過多的磁珠會導(dǎo)致背景更高；磁珠使用量少會造成產(chǎn)量降低。我們建議純化50μg 生物素化分子添加 50μl 完全懸浮的磁珠。
2. 將試管放在磁力分離器上1 分鐘。當(dāng)磁珠完全沉淀時，去除上清液。取下試管加入四倍 磁珠體積的d2H2O，充分混合。并將試管再次置于磁力分離器上1 分鐘，完全去除上清 液。
3. 按照步驟2 所述方式，用四倍磁珠體積的1x PBS 緩沖液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠體積的1xBlocking / Elution Buffer，通過渦旋充分混合，并在室溫下培養(yǎng)5 分鐘。將試管放在磁力分離器上1 分鐘。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠體積的1xRegenerationBuffer，通過渦漩充分混合，并將試管放在磁力分離 器上1 分鐘。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠體積的1x PBS Buffer，并按照步驟2 所述方式清洗磁珠。這些磁珠可以隨時使用。
提示：必須立即使用磁珠，否則粘合能力將顯著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的樣品，通過移液器吹吸充分混合，并在室溫下緩慢旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)30-60 分鐘。
8. 將試管放在磁力分離器上，保持試管留在分離器上的同時去除上清液。如步驟 2 所示， 用1x PBS 清洗磁珠，直到在280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠體積的Blocking/Elution Buffer，通過移液器吹吸充分混合，并在室溫下培養(yǎng) 5-10 分鐘，將與磁珠結(jié)合的生物素化分子洗脫下來。