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RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 無甘油
RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 無甘油
商品描述:
商品屬性
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RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 無甘油商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 無甘油
40KU
BJ-PJ6607
商品介紹:描 述 :
本酶為采用電子重構(gòu)架技術(shù)重組表達(dá)的 RNase Inhibitor, 可高效的與 RNase A/B/C 形成 1:1 的復(fù)合物,從 而保護(hù) RNA 免受降解。與野生型人源(human)、鼠源 (murine)、豬源(porcine) Inhibitor 比較來看,其在如下幾方 面得到明顯提升:(1)抗氧化/抗巰基類性能的提升,在 0-10mM DTT 濃度下,活性無明顯差異,因此不僅適用于 PCR,也可適用于轉(zhuǎn)錄等高濃度 DTT 體系。(2)親和力得 到明顯提升,在特定條件下可以完全抑制 RNase,從而長效 保護(hù)體系中的 RNA 分子。(3)耐熱性顯著提高,在 55°C 條件下加熱 10min 后,仍然保留 90%以上活性。
單位定義:抑制 5 ng RNase A 的 50%活性所需的 RNaseInhibitor 量定義為一個(gè)活性單位。
熱失活:65°C, 10min
應(yīng)用:
cDNA 合成反應(yīng)體外無細(xì)胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄或翻譯提高多聚核糖體的產(chǎn)量和活性
儲存:-80°C 可保存 3 年,-20°C 可保存 2 年。
由于該制品不含甘油成分,反復(fù)凍融 10 次的情況下,活性損失<5%。如制品經(jīng)常使用,融化后建議儲存于 2-8°C(2個(gè)月),或分裝后凍存。
使用方法
1. 按以下組分配制反應(yīng)體系
Golden MLV Reverse Transcriptase 0.5-1 μl
10×RT Buffer 2 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 1 μl
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
20×Oligo dT(25)&Random Primer * 1 μl
RNase Inhibitor (80 U/μl) 0.25 μl
RNase Free H2O Up to 20 μl
*注:Oligo dT(15)使用濃度為 20~50μM, 如使用 Random9隨機(jī)引物可使用 125μM,基因特異性引物可使用 5μM。
2.在 PCR 儀上按下列條件進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
30°C 15 min
55°C 30~60 min
85°C 10 min
4°C
3. 反轉(zhuǎn)錄所得的 cDNA 可直接用于 PCR 反應(yīng)或儲存于-20°C。