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Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsDNase)
Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsDNase)
商品描述:
商品屬性
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Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsDNase)商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsDNase)
100T
BJ-PJ6630
商品介紹:描述:
本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系 5×GoldenRT MasterMix 進(jìn)行 RNA 的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),使用時(shí)只需加入模板、引物和 RNase Free H2O 即可,大大簡(jiǎn)化了操作過(guò)程、提高了效率、減少了操作過(guò)程中的人為誤差。MasterMix 中添加了 HL dsDNase(熱敏雙鏈特異性核酸酶),該雙鏈特異性核酸酶(又名 gDNA Remover)可在反轉(zhuǎn)錄的過(guò)程中,直接降解去除 RNA 中殘留的基因組 DNA 污染(可去除100ng 基因組 DNA),從而在定量 PCR 的檢測(cè)中無(wú)需考慮基因組污染的干擾,設(shè)計(jì)的定量 PCR 引物也無(wú)需進(jìn)行橫跨外顯子。該試劑盒尤其適用于定量 PCR 檢測(cè)。該預(yù)混體系包含點(diǎn)突變致 RNase H 活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng) Buffer、HL dsDNase 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉(zhuǎn)錄酶去除了 RNase H 活性,從而避免反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中降解 RNA。同時(shí)經(jīng)過(guò)突變文庫(kù)篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng),可耐受 55℃高溫反應(yīng)。相比于低溫條件下反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),采用高溫反轉(zhuǎn)錄可顯著打開(kāi) RNA 二級(jí)結(jié)構(gòu),從而提高復(fù)雜 RNA模板的擴(kuò)增性能、提高反轉(zhuǎn)錄 cDNA 的長(zhǎng)度和產(chǎn)量,從而提高后續(xù)檢測(cè)的靈敏度。合成的第一鏈 cDNA 可廣泛用于 2ndStrand 的合成、雜交、PCR 擴(kuò)增、Real-Time PCR 反應(yīng)等。
應(yīng)用:
(1)該制品可有效反轉(zhuǎn)錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
(2)該制品不可反轉(zhuǎn)錄 microRNA、病毒 DNA/RNA 樣品
儲(chǔ)存:請(qǐng)置于-20°C,可保存 3 年;避免反復(fù)凍融。
注:如 5×Golden RT MasterMix (with dsDNase)出現(xiàn)沉淀屬正?,F(xiàn)象,可用手捂化,混合均勻后使用不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
注:通常在定量 PCR 實(shí)驗(yàn)中使用快速程序進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄效率>80%),在進(jìn)行高 GC 含量、含復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)、長(zhǎng)片段的模板轉(zhuǎn)錄時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)程序(反轉(zhuǎn)錄效率>100%)。