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6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit
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商品屬性
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6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit
100T
BJ-PJ6631
商品介紹:描述:本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預混體系 5×Fast RT MasterMix 進行 RNA 的反轉(zhuǎn)錄反應,使用時只需加入模板、 引物和 RNase Free H2O 即可,大大簡化了操作過程、提高 了效率、減少了操作過程中的人為誤差。 該預混體系包含快速 MLV7 反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應 Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的 MLV7 反轉(zhuǎn)錄酶 具有以下特性:RNase H 活性缺失,從而避免反轉(zhuǎn)錄過程中 降解 RNA;經(jīng)過突變文庫篩選,使得其熱穩(wěn)定性更強,可耐 受 50℃ 高溫反應,在 60℃ 條件下仍然具有 30%以上活性, 利于打開 RNA 二級結(jié)構(gòu),從而提高復雜 RNA 模板的擴增性 能;含有快速合成結(jié)構(gòu)域,將 MLV 的延伸速度提高了 3-4 倍,因此適用于快速反轉(zhuǎn)錄反應;優(yōu)化的反轉(zhuǎn)錄 Buffer 系統(tǒng), 可以獲得更高產(chǎn)量的 cDNA,從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。 合成的第一鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、 PCR 擴增、Real-Time PCR 反應等。
應用:
(1)該制品可有效反轉(zhuǎn)錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
(2)該制品不可反轉(zhuǎn)錄 microRNA
組分
儲存:請置于-20°C,可保存 3 年;避免反復凍融。
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應液
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
5×Fast RT MasterMix 4 μl
*20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*注:反轉(zhuǎn)錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.反應程序
50°C 5 min(cDNA 合成)
95°C 1 min(失活 MLV)
3. 采用 0.25-2μl 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,作為后續(xù)定量 PCR 或 PCR的擴增模板即可。