30min植物基因組DNA提取試劑盒

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號
30min植物基因組DNA提取試劑盒	50T	BJ-PJ6726

商品介紹：

描述：

該試劑盒采用獨(dú)特的裂解液，可快速可靠的從多糖、多酚含量較高的植物組織樣品中純化出高純度的 DNA。應(yīng)用本試劑盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反應(yīng)、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
（1） 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇，無需單獨(dú)添加。
（2）蛋白酶 K 和 Rnase A 長期保存請儲存于-20℃，短期室溫保存（6 個(gè)月），其它組分儲存于室溫。
（3）Plant AP2 含有 CTAB，室溫儲存會出現(xiàn)白色沉淀，使用前放置于 56℃水浴鍋中溶解后使用。
（4）自備試劑：氯仿。
操作方法
（1）樣本組織懸液制備研缽研磨法：在 1.5 ml EP 管中加入 600 μl 的 Plant AP1 裂解液，并在管蓋上加入 5 μl 的 Rnase A。將研磨后的植物組織（干重 40~60 mg，濕重 150 mg）加入到 Plant AP1 裂解液中，漩渦震蕩混合 15s。鋼珠研磨法：在研磨 EP 管中加入 700 μl 的 Plant AP1 裂解液，加入植物組織（干重 50~80 mg，濕重 200 mg），并加入鋼珠進(jìn)行研磨，研磨完畢后，取 600 μl 的組織懸液到新的
1.5 ml EP 管中，并在管蓋上加入 5 μl 的 Rnase A。
（2）向上述組織懸液中加入 250 μl Plant AP2 裂解液，漩渦混合 15s，56℃水浴鍋（或室溫）靜置 5min，以消化 RNA。
（3）向上述溶液中加入 20 μl 蛋白酶 K，漩渦混合 10s，于56℃水浴鍋（或室溫）中消化 5~15min。
（4）13,000rpm 離心 5min，吸取 600 μl 上清到新的 1.5mlEP 管中，并加入 500μl 的氯仿，漩渦混合 15s。
（5）13,000rpm 離心 2min，溶液將分為無色上層水相DNA）、中間層（蛋白）和綠色下層油相（酚類）。
（6）吸取 400 μl 上層無色上清液到新的 1.5 ml EP 管中，并加入 450 μl 的 Plant LB3 溶液，漩渦 10s 后，倒入到吸附柱中，13,000rpm 離心 1min。
（7）倒掉廢液。向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13,000rpm 離心 15s。重復(fù)此步驟一次。
（8）將吸附柱重新放回離心機(jī)，13000rpm 空離心 2min，將殘留的乙醇徹底甩干。
（9）將吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中，向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer，室溫放置 1min，13,000rpm 離心 1min，洗脫液即為基因組 DNA，冷凍保存。