>
PCR相關(guān)試劑 >
恒溫?cái)U(kuò)增系列 >
Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)商品屬性:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
1600U
BJ-PJ6558
Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
16KU
BJ-PJ6558
商品介紹:描 述 :
該 酶 來(lái) 源 于 Bacillus stearothermophilus DNAPolymerase I,通過(guò)基因工程手段去除了其 5’-3’外切酶活性,而保留了 5’-3’聚合酶活性。該酶具有很強(qiáng)的鏈置換能力,因此是 Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的絕佳用酶。與野生型 Bst DNA 聚合酶(大片段)相比,該酶在擴(kuò)增速度、產(chǎn)量、耐鹽性和熱穩(wěn)定性等方面均有大幅提高,同時(shí),該酶可以使用 dUTP 作為底物進(jìn)行擴(kuò)增(Bst 大片段無(wú)此活性)。
單位定義
一個(gè)活力單位即在 65°C 條件下,30 分鐘內(nèi)催化 10 nmoldNTP 的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
應(yīng)用:
DNA 等溫?cái)U(kuò)增
富含 GC 結(jié)構(gòu)的快速測(cè)序
微量模板 DNA 的快速測(cè)序
失活:
85°C,5min 失活。
儲(chǔ)存:-20℃可保存 3 年。
典型的 LAMP 反應(yīng)
1. 按以下組分配制 LAMP 反應(yīng)液
Bst 2.0 DNA Polymerase ( 8 U/μl) 0.25~1 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA 10 ng~1 μg
*10X Primers 2.5 μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4-8 μM LpF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事項(xiàng):
(1) Mg2+的使用濃度為 4~10 mM 濃度,Isothermo Buffer中沒(méi)有 Mg2+,通常情況下,在 6-8mM Mg2+條件下可獲得較好的 LAMP 結(jié)果。
(2) 有文獻(xiàn)報(bào)道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用無(wú)模板 DNA 作為對(duì)照檢測(cè)擴(kuò)增的特異性。