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Taq DNA連接酶





Taq DNA連接酶

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Taq DNA連接酶
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Taq DNA連接酶

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Taq DNA連接酶

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BJ-PJ6648

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描述:Taq DNA 連接酶是一種熱穩(wěn)定性連接酶,能夠催化 磷酸二酯鍵的形成,使與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相 鄰寡核苷酸鏈的 5´-磷酸末端和 3´-羥基末端通過磷酸二酯 鍵相連。該連接反應只有當兩條寡核苷酸鏈與互補靶 DNA 完全配對,并且兩條寡核苷酸鏈之間沒有空隙的條件下才可 發(fā)生。因此,可以用它來檢測單堿基替換。在 45℃-65℃ 范 圍內,Taq DNA 連接酶均有活性。該酶在 1XHiFi Taq Ligase Buffer 中具有絕佳的保真性連接。

組分

應用
雙鏈 DNA 切刻的修復
儲存:-20℃可保存半年,長期儲存請置于 -70℃。
活性定義:1 單位指 50μl 反應體系中,45℃ 條件下,15 分鐘內能使 50% 的 1μg 經 BstEII 消化的 λDNA 片段(12bp 粘性末端)發(fā)生連接所需要的酶量。該酶也可以使用 1×Taq DNA Ligase Buffer20 mM Tris-HCl(pH 7.6),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100,45℃ 溫育。 該酶需 NAD+ 作輔因子,在 10×Taq DNA 連接酶緩沖液中已添加 NAD+;為了延長 NAD+ 的半衰期,緩沖液應于 -70℃ 貯存。
使用方法
1、配制如下反應體系
DNA up to 1 µg
10×HiFi Taq Ligase Buffer 5 µl
Taq DNA Ligase 2 µl
滅菌水 up to 50 µl
2、45℃孵育 15min。

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