細菌鑒定方法簡述
細菌是一種單細胞生物體,生物學家把這種生物歸入 “裂殖菌類”。細菌細胞的細胞壁非常像普通植物細胞的細胞壁,但沒有葉綠素。因此,細菌往往與其他缺乏葉綠素的植物結(jié)成團塊,并被看作屬于“真菌”。通常細菌鑒定有如下的五種方法:
1.生化鑒定
是細菌鑒定中最重要的一種,主要是借助細菌對營養(yǎng)物質(zhì)分解能力的不同及其代謝產(chǎn)物的差異對細菌進行鑒定,包括蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物試驗、觸酶試驗、糖分解產(chǎn)物試驗、氧化酶試驗、凝固酶試驗等。
2.血清學鑒定
適用于含較多血清型的細菌,常用方法是玻片凝集試驗,并可用免疫熒光法、協(xié)同凝集試驗、對流免疫電泳、間接血凝試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等方法快速、靈敏地檢測樣本中致病菌的特異性抗原。用已知抗體檢測未知抗原(待檢測的細菌),或用已知抗原檢測患者血清中的相應(yīng)抗細菌抗體及其效價。血清學鑒定操作簡單快速,特異性高,可在生化鑒定基礎(chǔ)上為細菌鑒定提供確定診斷。
3.分子生物學檢測
適用于人工培養(yǎng)基不能生長、生長緩慢及營養(yǎng)要求高不易培養(yǎng)的細菌,檢測方法包括核酸擴增技術(shù)、核酸雜交、生物芯片及基因測序等。常見的核酸擴增技術(shù)有聚合酶鏈反應(yīng)、連接酶鏈反應(yīng)等,主要用于耐甲氧西林、結(jié)核分枝桿菌等病原菌的檢測。核酸雜交有斑點雜交、原位雜交等,用于致病性大腸埃希菌、沙門菌、空腸彎曲菌等致病菌的檢測。生物芯片包括基因芯片和蛋白質(zhì)芯片,主要是對基因、蛋白質(zhì)、細胞及其他生物進行大信息量分析的檢測技術(shù)。
4.微生物自動鑒定系統(tǒng)鑒定
可快速、準確地對臨床近千種常見分離菌進行鑒定,目前已在臨床實驗室廣泛使用。其中,細菌16S rRNA編碼基因已成為較理想的基因分離靶序列,逐漸成為臨床細菌鑒定、分離的金標準。
5.質(zhì)譜技術(shù)
是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜,用于分析細菌的化學分類和鑒定,具有高靈敏度和高質(zhì)量檢測范圍的優(yōu)點。主要是對核酸、蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子串聯(lián)質(zhì)譜進行分析。