生化檢測試劑盒與ELISA 試劑盒差異

       生化檢測 ，又稱臨床化學(xué)，是在研究人體健康和疾病的生物化學(xué)過程變化的基礎(chǔ)上，利用物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)的理論與技術(shù)的一門實驗學(xué)科。通過檢測諸如人體血液、尿液、腦脊液等樣本中化學(xué)物質(zhì)的量與質(zhì)的變化，為臨床醫(yī)生或研究者提供疾病診斷、病情監(jiān)測、療效觀察、判斷預(yù)后以及健康評價等信息，最終判斷被檢者是否存在潛在疾病或排除某些疾病、揭示疾病變化以及藥物治療對機體生物化學(xué)過程影響程度。             

      Elisa試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如:Elisa檢測試劑盒、Elisa Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

生化試劑盒和 Elisa試劑盒存在一些差異。最主要的還是兩者的原理問題。下面具體闡述：

                                  生化檢測試劑盒 VS ELISA 試劑盒

一、檢測原理：
1、ELISA試劑盒檢測原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯y(tǒng)i 烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法(圖A)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖B)等等。
抗體的特異性產(chǎn)生是由于抗原決定簇決定，抗體產(chǎn)生的過程也比較復(fù)雜，特別是小分子抗原必須偶聯(lián)到載體蛋白上才能產(chǎn)生抗體。
ELISA測定結(jié)果的表現(xiàn)形式:
物質(zhì)濃度：單位主要是μg/mL。
2、生化試劑盒檢測原理
生化試劑盒檢測的本質(zhì)就是某物質(zhì)化學(xué)變化的顯色反應(yīng)，其反應(yīng)過程可以劃分為四個區(qū)：延遲區(qū)、等速區(qū)、過渡區(qū)和平衡區(qū)，以時間為橫坐標、吸光度為縱坐標作圖。
延遲區(qū)：無規(guī)律可尋。
等速區(qū)：對應(yīng)的是速率法，一般應(yīng)用于酶活力的檢測。
過渡區(qū)：對應(yīng)的是固定時間法，目的是解決某些化學(xué)反應(yīng)的非特異性問題，提高準確度。
平衡區(qū)：對應(yīng)的是終點法，主要是測定某物質(zhì)在樣本中的含量。
目前，我公司的生化試劑盒采用的原理為：可見區(qū)的顯色反應(yīng)和紫外區(qū)的某一物質(zhì)變化量。某物質(zhì)與顯色劑反應(yīng)后，形成區(qū)別于自身的顏色反應(yīng)，在某一波長下，吸光度的強弱與物質(zhì)的含量呈正比關(guān)系。
生化測定結(jié)果的表現(xiàn)形式：
① 物質(zhì)濃度：單位主要是mg/L、mmol/L、μmol/mgprot等
② 某種能力和活力：世界上沒有真實物質(zhì)存在，以另一真實存在的物質(zhì)變化量來表示其能力大小;其單位為U/L、U/gprot等。例如酶活的單位：在特定條件下，每分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1 μmol底物的酶量為一個單位(U)，或者轉(zhuǎn)化1 μmol的有關(guān)基團的酶量。
二、從微觀角度來看
某一物質(zhì)的抗原決定簇的活性位點(或者抗原抗體特異性結(jié)合位點)，與化學(xué)反應(yīng)的活性位點可能存在差異。
生化試劑盒和ELISA試劑盒的檢測結(jié)果趨勢是正相關(guān)、負相關(guān)還是不相關(guān)的問題，需要更高技術(shù)設(shè)備和方法，以及大量的實驗數(shù)據(jù)來驗證。從原理中也說明了ELISA試劑盒分種屬，而生化試劑盒不分種屬的問題。