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如何制備I型和V型膠原蛋白
I型和V型膠原蛋白的制備方法 主要技術(shù)方法如下:將去除魚鱗及皮下組織的魚皮,清洗,瀝干,剪碎,烘干,粉碎后浸泡于0.1MNaOH溶液,攪拌后離心取沉淀,洗至接近中性,然后置于預(yù)冷水中,加入乙酸和胃蛋白酶后攪拌,離心取上清液,加入NaCl后鹽析,離心將沉淀溶解于含NaCl的Tris-HCl緩沖液中,離心后取上清液,再加入NaCl鹽析,離心后分別收集沉淀和上清液: (1)將沉淀溶解,透析,凍干,即得I型膠原蛋白; (2)上清液中再加入NaCl后鹽析,離心后取沉淀,溶解,透析,凍干,即得V型膠原蛋白,所有操作均在4°C下進(jìn)行。 本發(fā)明利用分級(jí)鹽析的方法制備I型和V型膠原蛋白,工藝簡(jiǎn)單,可操作性強(qiáng),成本低,效率高。
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