Tris緩沖液的知識(shí)小百科
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿，或加少量水稀釋時(shí)，這類溶液的pH值基本保持不變，我們稱這樣的溶液叫做緩沖溶液。下面來(lái)了解Tris緩沖液的相關(guān)知識(shí)。
Tris緩沖液的優(yōu)點(diǎn)：
① 因?yàn)門ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；
② 對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。
Tris緩沖液的缺點(diǎn)：
① 緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；
② 溫度效應(yīng)大，溫度變化對(duì)緩沖液pH值的影響很大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時(shí)緩沖液的pH＝8.4，則37℃時(shí)的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃；
③ 易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封；
④ 此緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。
Tris-HCl緩沖液的兩種配置方法：
第一種方法是分別配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列體積混合即可。
但是由于標(biāo)準(zhǔn)濃度的稀鹽酸不易配制，所以常用另一種方法：以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl緩沖液為例：先稱12.11 g Tris堿溶于950 mL～970 mL 去離子水中，邊攪拌邊滴加4 N HCl，用pH計(jì)測(cè)定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水補(bǔ)足到1 L。
Tris緩沖溶液的應(yīng)用：
在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑；Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲的中間纖維的形成；在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ)；將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。
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