簡(jiǎn)述生物緩沖劑與表面活性劑
我們經(jīng)常看到一些生物緩沖液的配方中除了緩沖劑和鹽之外,還添加有表面活性劑,比如某種Tris緩沖液中添加吐溫20,某種HEPES緩沖液中添加TritonX-100等等。那么緩沖溶液成分中的表面活性劑與緩沖劑有什么區(qū)別呢?
緩沖劑與表面活性劑的作用
首先,兩種實(shí)際的作用是不同的,緩沖劑的作用是調(diào)節(jié)pH值,維持體系中各物質(zhì)所適應(yīng)的pH的穩(wěn)定;表面活性劑從字面意義上理解就是,改變液體表面張力的試劑,常被用于肥皂、洗潔精、洗滌劑,所以也叫去污劑或去垢劑。
復(fù)雜成分的生物緩沖液配制
緩沖溶液中的配方成分
有些緩沖液的成分比較簡(jiǎn)單,只含緩沖劑和水,不過很多緩沖液的配方中都含有表面活性劑和一些鹽。在配制緩沖溶液時(shí),我們一般是參照手冊(cè)或者文獻(xiàn)上的配方,不會(huì)去深究其中的道理,照搬即可,但一個(gè)實(shí)驗(yàn)?zāi)芊裼闷渌彌_劑,或者不添加表面活性劑,亦或者某些裂解液為何還含10%甘油等問題,我們有時(shí)并不清楚。其實(shí)緩沖液配方中表面活性劑的用量雖然不大,但它的作用并不亞于緩沖劑。
同種緩沖液的多種配方
其實(shí)不同的生化實(shí)驗(yàn)即使用同一種緩沖劑也是有區(qū)別的,往往一些蛋白、核酸相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)中,緩沖系統(tǒng)除了緩沖劑外,還有表面活性劑以及多種不同的成分。就比如說蛋白質(zhì)純化就至少包含組織蛋白抽提、膜蛋白提取、核蛋白提取等等,更別說其它蛋白質(zhì)研究實(shí)驗(yàn)了。
常用的緩沖劑與表面活性劑
緩沖劑通常是一些兩性物質(zhì),比如說三羥甲基氨基甲烷Tris、細(xì)胞培養(yǎng)中的HEPES、核酸電泳中的MOPS、Bicine、CAPS等,這里的兩性是同時(shí)有酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán)。而表面活性劑也含有“兩性”,其分子結(jié)構(gòu)具有兩親性,既有親水性基團(tuán)又有疏水性基團(tuán),可改良溶液的性質(zhì),常用的有NP40、Tween-20、TritonX 100、CHAPS、脫氧膽酸鈉、SDS等等。